In vivo and in vitro activation of pulmonary macrophages by IFN-gamma for enhanced killing of Paracoccidioides brasiliensis or Blastomyces dermatitidis

Abstract

The fungicidal capacity of murine pulmonary macrophages (PuM) activated in vitro with IFN or lymphokines or in vivo with IFN was studied. PuM treated overnight with IFN (1000 U/ml), Con A-stimulated spleen cell culture supernatants, or lymph node cells plus Con A significantly killed yeast cells of the Gar w isolate of Paracoccidioides brasiliensis 45.5 +/- 2.1%, 72.0 +/- 4.2%, and 51.5 +/- 0.7% respectively. Two other isolates of P. brasiliensis (Ru and LA) were also killed (45 and 34%) by PuM activated by lymph node cells plus Con A. Control PuM had lesser but significant capacity for killing of P. brasiliensis isolates, ranging from 15 to 22%. Killing of P. brasiliensis by PuM activated by Con A-stimulated spleen cell culture supernatants could not be significantly inhibited by superoxide dismutase, catalase, or azide. When mice were treated in vivo with 4 X 10(5) IFN U i.p. and PuM isolated 24 h later, the PuM had significantly enhanced ability to kill P. brasiliensis (47.0 +/- 6.3%) compared with PuM from control mice (25.0 +/- 4.2%). PuM thus activated also showed enhanced killing (43%) of a second isolate compared with control PuM (22%). PuM from IFN-treated mice were able to significantly kill Blastomyces dermatitidis (37.5 +/- 0.7%) compared with control PuM (4.5 +/- 6.3%). These results show that PuM can be activated in vitro and in vivo by IFN for enhanced fungicidal activity against two pulmonary fungal pathogens and suggests that immunologic production of IFN could be an important factor in host defenses against these diseases.

Se estudió la capacidad fungicida de los macrófagos pulmonares murinos (PuM) activados in vitro con IFN o linfocinas o in vivo con IFN. PuM tratada durante la noche con IFN (1000 U / ml), sobrenadantes de cultivos de células de bazo estimulados con Con A, o células de nódulos linfáticos más Con A, células de levadura destruidas significativamente de la cepa Gar w de Paracoccidioides brasiliensis 45.5 +/- 2.1%, 72.0 + / - 4,2% y 51,5 +/- 0,7% respectivamente. Otros dos aislamientos de P. brasiliensis (Ru y LA) también fueron destruidos (45 y 34%) por PuM activado por células de los ganglios linfáticos más Con A. El control PuM tenía una capacidad menor pero significativa para matar los aislamientos de P. brasiliensis, que van desde 15 al 22%. La muerte de P. brasiliensis por PuM activado por sobrenadantes de cultivos de células de bazo estimulados con Con A no pudo ser inhibido significativamente por superóxido dismutasa, catalasa o azida. Cuando los ratones se trataron in vivo con 4 x 10 (5) IFN U i.p. y PuM aislado 24 h después, PuM tenía una capacidad significativamente mejorada para matar P. brasiliensis (47,0 +/- 6,3%) en comparación con PuM de ratones de control (25,0 +/- 4,2%). La PuM así activada también mostró una muerte mejorada (43%) de un segundo aislado en comparación con la PuM de control (22%). PuM de ratones tratados con IFN fue capaz de matar significativamente Blastomyces dermatitidis (37,5 +/- 0,7%) en comparación con PuM de control (4,5 +/- 6,3%). Estos resultados muestran que PuM puede ser activado in vitro e in vivo por IFN para mejorar la actividad fungicida contra dos patógenos fúngicos pulmonares y sugiere que la producción inmunológica de IFN podría ser un factor importante en las defensas del huésped contra estas enfermedades.