Electrophoretic Karyotype of Clinical Isolates of Paracoccidioides brasiliensis

Abstract

Chromosomal DNA molecules were obtained from eight clinical isolates ofParacoccidioides brasiliensisduring the early stages of the yeast to mycelial transformation process and were separated by contour-clamped homogeneous electric field gel electrophoresis. In seven of the isolates, it was possible to separate five bands, albeit with two different migration patterns (A and B). In the remaining isolate only four bands were observed (pattern C). The isolated chromosomes showed molecular sizes ranging from 3.2 to 10 Mb according toSchizosaccharomyces pombemolecular size standards. The three different patterns observed had bands of 3.2, 3.8, 4.1, 5.2, 6.7, 7.2, 8.8, and 10 Mb. These data imply that at least 30 Mb of the genome are organized as chromosomal macromolecules. Due to the fact thatP. brasiliensisspheroplasts are difficult to obtain, technical details are provided.

Se obtuvieron moléculas de ADN cromosómico de ocho aislamientos clínicos de Paracoccidioides brasiliensis durante las primeras etapas del proceso de transformación de levadura a micelio y se separaron mediante electroforesis en gel de campo eléctrico homogéneo de contorno pinzado. En siete de los aislamientos, fue posible separar cinco bandas, aunque con dos patrones de migración diferentes (A y B). En el aislamiento restante solo se observaron cuatro bandas (patrón C). Los cromosomas aislados mostraron tamaños moleculares que variaban de 3,2 a 10 Mb de acuerdo con los estándares de tamaño pombemolecular de Schizosaccharomyces. Los tres patrones diferentes observados tenían bandas de 3.2, 3.8, 4.1, 5.2, 6.7, 7.2, 8.8 y 10 Mb. Estos datos implican que al menos 30 Mb del genoma están organizados como macromoléculas cromosómicas. Debido al hecho de que P. brasiliensisspheroplasts son difíciles de obtener, se proporcionan detalles técnicos.